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“假陰性”? 病毒檢測關(guān)鍵設(shè)備PCR儀提供精準(zhǔn)支撐


  來源: 中國計量院 時間:2020-02-10 編輯:儀商WXF
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新型冠狀病毒肆虐,核酸檢測試劑盒的研制和廣泛使用,對于病例的確診起到了重要作用。不過有臨床醫(yī)生發(fā)現(xiàn),試劑檢測會出現(xiàn)“假陰性”和“假陽性”,如天津某新型冠狀病毒肺炎病例先后進(jìn)行了4次核酸檢測,前3次均為陰性,直到第4次檢測才呈陽性。雖屬于小概率事件,但為什么會出現(xiàn)類似“漏檢”情況?

“漏檢”情況的出現(xiàn)可能由多種因素導(dǎo)致,中國計量院前沿中心主任、研究員戴新華告訴記者,“可能是樣本的收集、處理運輸和保存不當(dāng),也可能是新型冠狀病毒核酸檢測試劑盒質(zhì)量問題,還有一種可能就是核心儀器的性能和運轉(zhuǎn)狀態(tài)不佳”。



“假陰性”“假陽性”從何而來?


25日,國家衛(wèi)健委發(fā)布《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案(試行第五版)》,根據(jù)該方案,目前病例確診共有熒光定量RT-PCR檢測和基因測序兩種方法。其中實時熒光RT-PCR檢測因其時間短、成本低等特點,已成為目前應(yīng)用最廣泛的新冠病毒確診的方法。


實時熒光定量RT-PCR檢測病毒的原理,簡單來說,就是將從病人呼吸道樣本或血液樣本中提取到的核酸和試劑配比好,隨后放到實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)分析儀(PCR儀)中,進(jìn)行PCR反應(yīng),通過溫度的升降,病人樣本中的新冠病毒核酸會被特異性的引物探針識別,從而進(jìn)行快速復(fù)制,使其熒光信號倍增,儀器檢測到熒光信號的變化,并以擴增曲線形式呈現(xiàn),以此來最終確診病人樣本中是否含有新冠病毒。


“病例確診,除了試劑盒,還離不開檢測設(shè)備,”戴新華說,“參數(shù)準(zhǔn)確性能可靠的PCR儀,加上質(zhì)量可靠的核酸檢測試劑盒,兩者相互配合才能確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性?!比绻糜诓《竞怂釞z測的核心儀器PCR儀存在問題,如溫度控制不準(zhǔn)確、溫度均勻性差別太大、熒光光路系統(tǒng)異常、熒光染料污染等情況,就會出現(xiàn)“假陰性”或“假陽性”結(jié)果,從而導(dǎo)致“漏檢”。


病毒檢測的關(guān)鍵設(shè)備


作為病毒檢測的核心關(guān)鍵設(shè)備,PCR儀的工作狀態(tài)如何,將直接影響病毒檢測的效率和準(zhǔn)確度, 因此,對PCR儀的校準(zhǔn)尤為重要。為此,早在2015年,由中國計量院主導(dǎo)完成的《JJF1527-2015聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)分析儀校準(zhǔn)規(guī)范》就已發(fā)布實施。該規(guī)范第一起草人、中國計量院前沿中心副研究員高運華介紹說,該規(guī)范在國家層面上規(guī)定了PCR儀計量校準(zhǔn)的技術(shù)流程和性能指標(biāo),計量性能指標(biāo)包括:溫度示值誤差、溫度均勻度、平均升溫速率、平均降溫速率、樣本示值誤差、樣本線性等6個指標(biāo)。


在該規(guī)范和中國計量院相關(guān)專家指導(dǎo)下,上海、浙江、江蘇、遼寧、云南、四川、河北等近10個省市的計量技術(shù)機構(gòu)先后建立了計量標(biāo)準(zhǔn),開展相關(guān)PCR儀的校準(zhǔn)工作。與此同時,中國計量院建立了相對完善的PCR儀校準(zhǔn)能力,配備了各種類型的標(biāo)準(zhǔn)器,適用于16孔、24孔、32孔、48孔、96孔、384孔等不同控溫模塊PCR儀的性能校準(zhǔn),還研制了定量PCR儀校準(zhǔn)用國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。



確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠


此次疫情爆發(fā)后,全國各地醫(yī)療機構(gòu)PCR儀檢測需求激增,各地計量技術(shù)機構(gòu)夜以繼日地為所在省市的疾病預(yù)防控制中心、定點醫(yī)院的PCR儀進(jìn)行計量校準(zhǔn)服務(wù),保障新型冠狀病毒檢測結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。而在他們工作的背后,中國計量院為其提供量值溯源、咨詢和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等支撐服務(wù)。截至25日,已累計為南京市計量院等全國各級計量技術(shù)機構(gòu)提供了44PCR儀器校準(zhǔn)用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)服務(wù),有效保障了地方計量技術(shù)機構(gòu)PCR儀校準(zhǔn)結(jié)果的溯源性和可靠性。


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