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保健食品中西地那非和他達(dá)拉非的快速檢測-膠體金免疫層析法


  來源: 市場監(jiān)管總局 時間:2019-10-15 編輯:儀商WXF
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準(zhǔn)確稱取試樣0.5 g±0.01 g15 mL離心管中,加1 mL甲醇(3.1.1),渦旋30 s,4000 rpm離心2 min或靜置2 min。取200 μL上清液于15 mL離心管中,加入3 mL緩沖液(3.1.6),渦旋混合30 s,作為待測液。

注:試樣提取和凈化(5.2)過程可按照試劑盒說明書操作,不做限定。

5.3 測定步驟

5.3.1 試紙條與金標(biāo)微孔測定步驟

吸取200 μL樣品待測液于金標(biāo)微孔中,抽吸5~10次使混合均勻,室溫溫育5 min;溫育結(jié)束后,將試紙條吸水海綿端垂直向下插入金標(biāo)微孔中,室溫溫育5 min,從微孔中取出試紙條,去掉試紙條下端的吸水海綿,進(jìn)行結(jié)果判定。

注:測定步驟建議按照試劑盒說明書。

5.3.2 檢測卡與金標(biāo)微孔測定步驟

吸取200 μL上述待測液于金標(biāo)微孔中,上下抽吸5~10次使混合均勻。室溫溫育5 min,將反應(yīng)液全部加入到檢測卡的加樣孔中,將金標(biāo)微孔中全部溶液滴加到檢測卡上的加樣孔中,溫育5 min,進(jìn)行結(jié)果判定。

注:測定步驟建議按照試劑盒說明書。

5.4 質(zhì)控試驗

每批樣品應(yīng)同時進(jìn)行空白試驗和加標(biāo)質(zhì)控試驗。

5.4.1 空白試驗

準(zhǔn)確稱取固體空白試樣0.5 g±0.01 g或量取液體空白試樣0.5 mL±0.02 mL15 mL離心管中,按照5.25.3步驟與試樣同法操作。

5.4.2 加標(biāo)質(zhì)控試驗

準(zhǔn)確稱取固體空白試樣0.5 g±0.01 g或量取液體空白試樣0.5 mL±0.02 mL15 mL離心管中,加入適量標(biāo)準(zhǔn)工作液(3.3.2),使西地那非參考物質(zhì)濃度為1.0 μg/g1.0 μg/mL,按照5.25.3步驟與試樣同法操作。

準(zhǔn)確稱取固體空白試樣0.5 g±0.01 g或液體空白試樣0.5 mL±0.02 mL15 mL離心管中,加入適量標(biāo)準(zhǔn)工作液(3.3.4),使他達(dá)拉非參考物質(zhì)濃度為1.0 μg/g1.0 μg/mL,按照5.25.3步驟與試樣同法操作。


6 結(jié)果判定

通過對比控制線(C線)和檢測線(T線)的顏色深淺進(jìn)行結(jié)果判定。目視判定示意圖見圖1。結(jié)果判定也可根據(jù)產(chǎn)品說明書進(jìn)行。

6.1 無效

控制線(C線)不顯色,表明不正確操作或試紙條無效。

6.2 陰性結(jié)果

控制線(C線)顯色,檢測線(T線)顏色比控制線(C線)顏色深或檢測線(T線)顏色與控制線(C線)顏色相當(dāng),均表示樣品中不含待測組分或含量低于方法檢測限,判為陰性。

6.3 陽性結(jié)果

控制線(C線)顯色,檢測線(T線)顏色比控制線(C線)顏色明顯淺或檢測線(T線)不顯色,均表示樣品中待測組分含量高于方法檢測限,判為陽性。

6.4 質(zhì)控試驗要求

空白試驗測定結(jié)果應(yīng)為陰性,加標(biāo)質(zhì)控試驗測定結(jié)果應(yīng)為陽性。


圖1 目視判定示意圖

7 結(jié)論

當(dāng)檢測結(jié)果為陽性時,應(yīng)對結(jié)果進(jìn)行確證。


8 性能指標(biāo)

8.1 檢出限

固體樣品1.0 μg/g,液體樣品1.0 μg/mL

8.2 靈敏度

靈敏度≥95%。

8.3 特異性

特異性≥90%。

8.4 假陰性率

假陰性率≤5%

8.5 假陽性率

假陽性率≤10%。

注:性能指標(biāo)計算方法見附錄A。

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