正文中各品種項下規(guī)定的條件除固定相種類、流動相組分、檢測器類型不得任意改變外，其余如色譜柱內(nèi)徑、長度、固定相牌號、載體粒度、流動相流速、混合流動相各組分的比例、柱溫、進(jìn)樣量、檢測器的靈敏度等，均可適當(dāng)改變， 以適應(yīng)具體品種并達(dá)到系統(tǒng)適用性試驗的要求。
2、系統(tǒng)適用性試驗
按各品種項下要求對儀器進(jìn)行適用性試驗，即用規(guī)定的對照品對儀器進(jìn)行試驗和調(diào)整，應(yīng)達(dá)到規(guī)定的要求；或規(guī)定分析狀態(tài)下色譜柱的最小理論板數(shù)、分離度和拖尾因子.
(1) 色譜柱的理論板數(shù)(n) 在選定的條件下，注入供試品溶液或各品種項下規(guī)定的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶液，記錄色譜圖，量出供試品主成分或內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的保留時間t(以分鐘或長度計，下同，但應(yīng)取相同單位)和半高峰寬(W )，按n＝5.54(t／W)計算色譜柱的理論板數(shù)，如果測得理論板數(shù)低于各品種項下規(guī)定的最小理論板數(shù)，應(yīng)改變色譜柱的某些條件(如柱長、載體性能、色譜柱充填的優(yōu)劣等)，使理論板數(shù)達(dá)到要求。
(2) 分離度 定量分析時，為便于準(zhǔn)確測量，要求定量峰與其他峰或內(nèi)標(biāo)峰之間有較好的分離度。分離度(R)的計算公式為：2(t－t) R＝─W＋W 式中t為相鄰兩峰中后一峰的保留時間；t為相鄰兩峰中前一峰的保留時間；W及W為此相鄰兩峰的峰寬。 除另外有規(guī)定外，分離度應(yīng)大于1.5。
(3) 拖尾因子 為保證測量精度，特別當(dāng)采用峰高法測量時，應(yīng)檢查待測峰的拖尾因子(T)是否符合各品種項下的規(guī)定，或不同濃度進(jìn)樣的校正因子誤差是否符合要求。拖尾因子計算公式為：W T＝─ 2d 式中W為0.05峰高處的峰寬；d為峰極大至峰前沿之間的距離。 除另有規(guī)定外，T應(yīng)在0.95～1.05間。 也可按各品種校正因子測定項下，配制相當(dāng)于80％、100％和120％的對照品溶液，加入規(guī)定量的內(nèi)標(biāo)溶液，配成三種不同濃度的溶液，分別注樣3次，計算平均校正因子，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于2.0％。
3、測定法
定量測定時，可根據(jù)樣品的具體情況采用峰面積法或峰高法。但用歸一法或內(nèi)標(biāo)法測定雜質(zhì)總量時，須采用峰面積法。
(1) 面積歸一化法測定供試品(或經(jīng)衍生化處理的供試品)中各雜質(zhì)及雜質(zhì)的總量限度采用不加校正因子的峰面積歸一法。計算各雜質(zhì)峰面積及其總和，并求出占總峰面積的百分率。但溶劑峰不計算在內(nèi)。色譜圖的記錄時間應(yīng)根據(jù)各品種所含雜質(zhì)的保留時間決定，除另有規(guī)定外，可為該品種項下主成分保留時間的倍數(shù)。
(2) 主成分自身對照法當(dāng)雜質(zhì)峰面積與成分峰面積相差懸殊時，采用主成分自身對照法。在測定前，先按各品種項下規(guī)定的雜質(zhì)限度，將供試品稀釋成一定濃度的溶液作為對照溶液，進(jìn)樣，調(diào)節(jié)檢測器的靈敏度或進(jìn)樣量，使對照溶液中的主成分色譜峰面積滿足準(zhǔn)確測量要求。然后取供試品溶液，進(jìn)樣，記錄時間，除另有規(guī)定外，應(yīng)為主成分保留時間的倍數(shù)。根據(jù)測得的供試品溶液的各雜質(zhì)峰面積及其總和并和對照溶液主成分的峰面積比較，計算雜質(zhì)限度。
(3) 內(nèi)標(biāo)法測定供試品中雜質(zhì)的總量限度 采用不加校正因子的峰面積法。
