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保健食品中巴比妥類(lèi)化學(xué)成分的快速檢測(cè)-膠體金免疫層析法


  來(lái)源: 市場(chǎng)監(jiān)管總局 時(shí)間:2019-10-15 編輯:儀商WXF
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近日市場(chǎng)監(jiān)管總局批準(zhǔn)發(fā)布了《保健食品中巴比妥類(lèi)化學(xué)成分的快速檢測(cè)-膠體金免疫層析法》(KJ201903),本方法規(guī)定了保健食品中巴比妥類(lèi)化學(xué)成分的膠體金免疫層析快速檢測(cè)方法。


1 范圍

本方法適用于硬膠囊、軟膠囊、丸劑、片劑、散劑及口服液等保健食品中巴比妥類(lèi)化學(xué)成分的快速測(cè)定。


2 原理

本方法采用競(jìng)爭(zhēng)抑制免疫層析原理。樣品中的巴比妥類(lèi)化學(xué)成分經(jīng)提取后與膠體金標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合,抑制了抗體和檢測(cè)線(xiàn)(T線(xiàn))上抗原的結(jié)合,從而致使檢測(cè)線(xiàn)不顯色。通過(guò)檢測(cè)線(xiàn)的顯色與否判讀,定性判定樣品中是否含有巴比妥類(lèi)化學(xué)成分。


3 試劑和材料

除另有規(guī)定外,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T 6682規(guī)定的二級(jí)水。

3.1 試劑:

3.1.1 無(wú)水乙醇。

3.1.2 提取液:將無(wú)水乙醇(3.1.1)與水按照體積比10:90混勻。

3.1.3 甲醇。

3.2 參考物質(zhì)

3.2.1本方法所用巴比妥、苯巴比妥、異戊巴比妥、司可巴比妥鈉等參考物質(zhì)的中文名稱(chēng)、英文名稱(chēng)、CAS登錄號(hào)、分子式、相對(duì)分子量見(jiàn)表1,純度≥95%。


1 參考物質(zhì)的中文名稱(chēng)、英文名稱(chēng)、CAS登錄號(hào)、分子式、相對(duì)分子量

注:或等同可溯源物質(zhì)。


3.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

3.3.1 巴比妥類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(0.5 mg/mL):精密稱(chēng)取巴比妥(或苯巴比妥,異戊巴比妥,司可巴比妥鈉)標(biāo)準(zhǔn)品(3.2.1)適量,置于10mL容量瓶中,加入適量甲醇(3.1.3)超聲溶解后,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為0.5 mg/mL的巴比妥類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。﹣20 ℃避光保存,有效期6個(gè)月。

3.3.2 巴比妥類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)中間液(50 μg/mL):精密量取巴比妥類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(0.5 mg/mL)(3.3.11mL,置于10mL容量瓶中,用甲醇(3.1.3)稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為50 μg/mL的巴比妥類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)中間液。

3.4材料

3.4.1免疫膠體金免疫層析試劑盒,適用于保健食品硬膠囊、軟膠囊、丸劑、片劑、散劑及口服液。

3.4.1.1檢測(cè)卡。


4 儀器和設(shè)備

4.1 離心管:15mL

4.2 渦旋混合器。

4.3 剪刀。

4.4 塑料吸管。

4.5 電子天平:感量為0.01 g。

4.6 離心機(jī):轉(zhuǎn)速≥4000r/min,轉(zhuǎn)子配套15mL離心管。

4.7移液器:200μL

4.8環(huán)境條件:溫度15℃~35℃,濕度≤80%


5.分析步驟

5.1試樣制備

取適量樣品,硬膠囊及軟膠囊取內(nèi)容物充分混勻,丸劑及片劑充分粉碎混勻,散劑及口服液充分混勻。

5.2試樣提取

準(zhǔn)確稱(chēng)取試樣2 g(精確至0.01 g)于15mL具塞離心管中,加入10mL提取劑(3.1.2)。加蓋后振搖或渦旋振蕩0.5 min,放置至澄清(30 min內(nèi))或4000 r/min離心5min,取上清液作為待測(cè)液,立即測(cè)定。

注:試樣提取和凈化(5.2)過(guò)程可按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作,不做限定。

5.3 測(cè)定步驟

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